Techniques microscopiques
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Bibliographie
Acronymes
Glossaire
Crédits des ressources
Techniques microscopiques
Cours
Le microscope polarisant
Observations en transmission
Microscopie en éclairage orthoscopique
Figure 1 : Principe du microscope polarisant en transmission (éclairage orthoscopique)
Figure 2 : Exemple de platine porte échantillon précisément orientable d'un microscope polarisant
Figure 3 : Cristaux d'acide citrique. Microscope polarisant en éclairage orthoscopique
Microscopie en éclairage conoscopique
Figure 4 : Principe du microscope polarisant en observation conoscopique
Figure 5 : Conoscopie
Observations en réflexion
Eclairage orthoscopique en réflexion
Figure 6 : Principe du microscope polarisant en réflexion (éclairage orthoscopique)
Fond noir et contraste de phase
Figure 7 : Exemples d'amélioration de contraste par filtrage des fréquences spatiales
Rappels sur le filtrage des fréquences spatiales
Figure 8 : Double diffraction et filtrage des fréquence spatiales en microscopie
Strioscopie et fond noir
Description du filtrage de la strioscopie
Figure 9 : principe du filtrage des fréquences spatiales de la strioscopie en éclairage cohérent
Mise en œuvre pratique du fond noir en diascopie
Figure 10 : Principe de l'éclairage fond noir en diascopie
Figure 11 : Filtrage des fréquences spatiale en éclairage ‘fond noir'
Fond noir en épiscopie
Figure 12 : Schéma de principe d'un objectif pour fond noir épiscopique avec son optique annulaire d'éclairage et son ‘bloc miroir d'éclairage'
Contraste de phase
Description du filtrage
Figure 13 : principe du filtrage des fréquences spatiales du contraste de phase en éclairage cohérent
Mise en œuvre pratique
Figure 14 : Filtrage des fréquences spatiale du contraste de phase en éclairage partiellement cohérent dû à un diaphragme d'ouverture moyennement ouvert.
Figure 15 : Filtrage des fréquences spatiale du contraste de phase en éclairage partiellement cohérent dû à un diaphragme d'ouverture annulaire (cas le plus classique)
Figure 16 : Photographies du plan de Fourier (contraste de phase)
Techniques interférométriques
L'objectif de Mirau
Figure 17 : Schéma de principe de l'objectif de Mirau
Figure 18 : Image donnée en lumière blanche par un objectif de Mirau
Figure 19 : Photographie d'un objectif de Mirau commercial et de la cale piézoélectrique permettant de réaliser le ‘phase-shift'
Figure 20 : Variation du contraste des franges données par un objectif de Mirau en fonction de la nature locale de l'objet
Contraste interférentiel différentiel ‘NOMARSKI'
Interférométrie à décalage latéral et contraste interférentiel différentiel
Figure 21 : Représentation schématique de l'interférométrie à décalage latéral
Figure 22 : Microphotographies en contraste interférentiel différentiel
Réalisation pratique en microscopie par réflexion
Figure 23 : Schéma d'un microscope en contraste interférentiel différentiel épiscopique
Figure 24 : Principe de la mise en œuvre du CID par prismes biréfringents
Figure 25 : Orientation de la polarisation des rayons incidents et des lignes neutres du prisme biréfringent
Figure 26 : Autocompensation de l'interféromètre en réflexion et décompensation volontaire par translation horizontale du prisme de Wollaston ou de Nomarski
CID Nomarski en transmission
Figure 27 : Mise en œuvre du CID Nomarski en transmission
Microscopie de fluorescence
Principe de l'épifluorescence
Figure 28 : “Cube” pour illumination en épifluorescence
Etudes de cas
Technique utilisant la polarisation
Diascopie
Figure 1 : Lame mince de granit d'épaisseur 30 µm observée en transmission avec un objectif x10.
Figure 2 : Teintes de Newton et abaques de détermination de la biréfringence
Figure 3 : Tracé des surfaces d'onde ordinaire et extraordinaire pour une onde plane monochromatique se propageant dans une lame biréfringente positive dont la direction de l'axe optique fait un angle θ avec le dioptre d'entrée
En épiscopie
Figure 4 : L'observation entre polariseurs croisés permet de bien mettre en évidence les différents grains d'aluminium
photo réalisée par G. Blanc, EMSE
Figure 5 : Mise en évidence des différents grains à l'aide des teintes de Newton
photo réalisée par G. Blanc, EMSE
Fond noir ou strioscopie
Diascopie
Figure 6 : Fibres synthétiques observées en fond clair et noir
Épiscopie
Figure 7
Figure 8 : Intérieur d'une empreinte perçue lors d'une observation en fond noir
Figure 9 : Mise en évidence des oxydes d'aluminium dans un acier
photographies réalisée par G. Blanc de l'Ecole des Mines de Saint Etienne
Technique du contraste de phase
Diascopie
Figure 10 : Coupe de glande mammaire de rat d'épaisseur 14 µm, colorée ; microscope équipé d'un objectif x10
Figure 11 : Cellules épithelialse en fond clair (a) et en contraste de phase (b), objectif utilisé x40
Contraste interférentiel différentiel DIC en épiscopie
Épiscopie
Figure 12 : Wafer
Figure 13 : Suivant la position du prisme de Nomarski, la couleur du fond de l'image varie, observation d'un cordon de soudure carboné ; microscope équipé d'un objectif x50
Figure 14 : Mise en évidence des carbures de chrome
photographie de l'Ecole des Mines de Saint Etienne
Figure 15 : Oservation en contraste interférentiel différentiel d'un alliage d'aluminium et de silicium pour 2 positions différentes du prisme, de Nomarski les photographies (a) et (b) sont prises avec un objectif x10
Figure 16 : Observation d'une empreinte de dureté Vickers dans un cordon carbonné en contraste interférentiel différentiel avec un microscope équipé d'un objectif x10
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